Среды для бак посевов

Добавил пользователь Алексей Ф.
Обновлено: 19.09.2024

Бактериологический (культуральный) метод исследования заключается в выявлении патогенных микроорганизмов и определении их чувствительности к антибиотикам. Процесс выявления микроорганизмов состоит из нескольких этапов:

1. Посев материала на питательные среды.
2. Получение чистых культур микроорганизмов.
3. Идентификация микроорганизмов.
4. Определение чувствительности к антибиотикам, антимикотиков.

Первый и второй этапы бактериологического исследования одинаковы и для классического, и для автоматического бактериологического методов.

Первый этап

Биологический материал высевают на питательные среды. Для каждого вида биологического материала используется определенный набор питательных сред. Это связано с тем, что в разных видах биологического материала находятся различные виды микроорганизмов и необходимо, чтобы выросли максимально все. Используются питательные среды общего назначения - на них растет подавляющее большинство микроорганизмов - кровяной агар, шоколадный агар; дифференциальные среды - позволяют отличать разные виды микроорганизмов - среда Эндо для энтеробактерий, селективные среды - растут только отдельные виды бактерий - энтерококагар для выявления энтерококков, маннитол-солевой агар для обнаружения стафилококков.

Посев делают таким образом, чтобы получить отдельные изолированные колонии.

Посевы помещают в термостат, как правило, на 24 ч при 37С. Некоторые посевы инкубируют при 28С, а некоторые в течение 48 часов. Посевы для выявления грибов рода Candida до 5 суток, мицелиальных грибов - до 30 суток.

Второй этап

Просматривают посевы на питательных средах. По внешнему виду колоний (размер, цвет, форма), определёнными быстрыми тестами и микроскопией определяют возможный вид микроорганизмов и их значение в конкретном случае. Избранные колонии отсеивают на универсальные питательные среды для накопления чистой культуры микроорганизмов. В случае роста колоний только одного вида можно проводить идентификацию и определение чувствительности без этапа накопления чистой культуры.

Третий этап

В зависимости от вида микроорганизма проводят его идентификацию (определение биохимических и антигенных свойств) с помощью фиксированного набора субстратов и сывороток. Субстратами являются углеводы, аминокислоты и другие сложные соединения. По результатам устанавливают род и вид микроорганизма.

Для установления вида некоторых микроорганизмов может потребоваться серологическая идентификация.

Все среды для идентификации и определения чувствительности к антибиотикам готовятся и стерилизуются отдельно. Такая процедура очень трудоемкая, то есть требует много ручного труда и времени, дополнительного оборудования. Таким образом у данного метода низкий уровень стандартизации.

Для идентификации некоторых требовательных клинически значимых видов микроорганизмов необходимы сложные и дорогие субстраты, которые в рутинной практике трудно готовить и использовать. Из-за этого спектр микроорганизмов, которые можно было бы идентифицировать, сужается по сравнению с возможностями автоматического анализатора.

Четвертый этап

Определение чувствительности к антибиотикам проводится с учетом результатов идентификации и вида биологического материала.

При использовании классического бактериологического метода, определение чувствительности к антибиотикам происходит диско-диффузным методом. Этот метод базируется на изучении зон задержки роста микроорганизма вокруг бумажного диска, который пропитан антибиотиком. В зависимости от зон задержки роста определяют устойчивые, умеренно-стойкие и чувствительные штаммы микроорганизмов к тому или иному антибиотику. Данный метод является наиболее распространенным для изучения чувствительности, а также дешевым и простым в исполнении. Однако он также плохо поддается стандартизации, поскольку требует много ручного труда.

Кроме того, согласно рекомендациям международных организаций, которые занимаются совершенствованием существующих методик и разработкой новых (EUCAST - Европейский комитет по определению чувствительности к антибиотикам, CLSI - Институт клинических лабораторных стандартов), чувствительность к некоторым антибиотикам НЕЛЬЗЯ определять диско-диффузным методом, поскольку не определены критерии оценки полученных результатов.

1. колистином - кишечная палочка, клебсиелла и другие энтробактерии, синегнойная палочка, ацинетобактер;
2. бета-лактамы (пенициллины, цефалоспорины, карбапенемы), гликопептиды (ванкомицин, тейкопланин), даптомицином, фосфомицин – стафилококки;
3. даптомицином - стрептококки групп А, В, С и G;
4. меропенем - пневмококки при менингитах;
5. бета-лактамы (пенициллины, цефалоспорины, карбапенемы) – пневмококки.

Кроме того существуют микроорганизмы, чувствительность которых к антибиотикам вообще нельзя определять диско-диффузным методом: Neisseria gonorrhoea, Neisseria meningitidis, все анаэробные микроорганизмы, Helicobacter pylori, Candida spp., Aspergilus spp. и другие мицелиальные грибы.

В настоящее время проведения микробиологических исследований является важной и актуальной деятельностью в биологии и медицине, так как они позволяют с высокой степенью точности и достоверности подтвердить или опровергнуть факт присутствия в организме человека возбудителей инфекционных заболеваний. Классический бактериологический метод исследования решает задачи выделения чистой культуры возбудителя с его последующей идентификацией. Благодаря микробиологическим методам исследования можно установить возбудителей тех или иных инфекционных заболеваний и подобрать рациональное лечение этого заболевания.

Преимущества автоматического метода

1. Скорость получения результата. Результат наших исследований является максимально быстрым. Уже на 3 сутки Вы получаете название микроорганизма, который был обнаружен в исследуемом образце, а также его чувствительность к антибиотикам. (!) Срок исследований в автоматическом методе продлен до 5 суток за счет длительного роста грибов рода Candida.

2. Точность. Автоматический анализатор дает возможность быстро и очень точно определить какой именно из 400 микроорганизмов есть в биоматериале.

3. Большой спектр антибиотиков к которым определяется чувствительность позволяет врачу назначить наиболее рациональную антибиотикотерапию с учетом характера заболевания и особенностей пациента. К тому же определение чувствительности таким методом является максимально быстрым и точным по сравнению с классическим.

Важно! В результате микробиологического исследования проведенного автоматическим методом антибиотикочувствительность издается с показателем МИК * (минимальная ингибирующая концентрация)

Взятие анализов и их транспортировка являются одним из ответственных этапов в работе лабораторий, обеспечивающим успех исследований. Если допущена ошибка на самом первом этапе взятия и траспортировки проб, вся работа лаборатории может оказаться не только бесплодной, но и послужить причиной назначения неадекватного лечения пациенту, от коготорого получен биоматериал.

Общими требованиями к процедуре отбора и транспортировки проб являются:

Знание оптимальных сроков для взятия материала на исследование;
Отбор материала из места максимальной локализации возбудителя;
Отбор материала для исследования в необходимом и достаточном объеме с обеспечением условий, исключающих контаминацию проб;
По возможности, взятие материала производится до применения антибиотиков и других химиотерапевтических препаратов или после отмены антибиотиков через 10 дней (кроме исследования на дисбактериоз);
Материал для бактериологических исследований забирают только в стерильную, маркированную посуду;
Материал доставляется в контейнерах, не допуская опрокидывания и расгерметизации.
Материал доставляется в лабораторию немедленно или в течение 1-2 часов. При увелечении времени доставки проб до 48 часов необходимо использовать специальные транспортные среды.

Правила отбора проб клинического материала для бактериологических исследований

Разнообразие материала и своеобразие микрофлоры отдельных тканей требует применения определенных методических приемов отбора проб:

Материал от больных необходимо брать до лечения антибактериальными препаратами или не ранее 10 дней после окончания курса лечения.
Следует брать материал непосредственно из очага инфекции или исследовать клинический материал, отражающий воспалительный процесс в тех или иных органах и тканях (например, мочу при уроинфекциях, кал при дисбактериозах кишечника и т.д.).
Важно соблюдать правила асептики для исключения контаминации пробы посторонней микрофлорой.
При взятии проб можно использовать стерильные ватные тампоны, транспортные среду, шприцы (для крови, гнойного отделяемого и т.д.).
Материал для бактериологического исследования должен быть доставлен в лабораторию не позже 1-2 часов после отбора проб, так как более длительное пребывание при комнатной температуре приводит к гибели ряда микроорганизмов, в том числе возбудителей инфекционного процесса и размножению в этих материалах посторонней гнилостной микрофлоры.

В случае хранения материала в холодильнике срок хранения можно увеличить до 3-4 часов (это не относится к пробам крови и спиномозговой жидкости). Пренебрежение сроками доставки материала приводит к искажению результатов исследования. Использование транспортных сред удлиняет сроки хранения материала до 24-48 ч.

Правила сбора мочи для женщин

Помыть руки с мылом. Вымойте область наружных половых органов. Во избежание попадания в мочу выделений из влагалища, во время сбора мочи женщинам, живущим половой жизнью, рекомендуется ввести во влагалище тампон. Снять крышку с контейнера и взять его в руку, стараясь не касаться краев. Удерживая половые губы разведенными, выпустите немного мочи в унитаз, приостановите мочеиспускание, а затем, подставив контейнер под струю мочи, наполните его до половины объема (10-30 мл). Не прикасаться контейнером к телу. Плотно закрыть. Доставить в лабораторию в течении 1,5-2 часов.

Правила сбора мочи у грудных детей

Провести туалет наружных половых органов, собирать мочу в одноразовый мочеприемник. Моча выжатая из одноразовых подгузников, исследованию не подлежит. Доставить в лабораторию в течении 1,5-2 часов.

Правила сбора мочи для мужчин

Вымойте руки с мылом. Отведите назад крайнюю плоть (если она не обрезана), головку полового члена вымыть с мылом теплой кипяченой водой, просушить с помощью чистой салфетки. Подготовить контейнер для мочи, слегка открутить крышку так, чтобы ее легко можно было снять. Не дотрагиваться руками до внутренних стенок контейнера и крышки. Выпустить небольшое количество мочи в унитаз (или судно). Приостановите мочеиспускание. Удерживая крайнюю плоть в отведенном положении, направьте струю мочи в контейнер и наполните его до указанного уровня. Тщательно закройте контейнер крышкой. Доставить в лабораторию в течении 1,5-2 часов.

Бак посев на флору — метод определения наличия тех или иных микроорганизмов во флоре пациента. С помощью этого анализа врач может подтвердить диагноз и назначить самые эффективные методы лечения.

Гинекология, как и любая другая отрасль медицины, любит конкретику. Здесь не место недостоверным результатам обследований. Бак посев на флору с большой точностьюопределяет, какие именно микроорганизмы мешают жить спокойно.

Ход процедуры

У пациента берут биологический материал, помещают его в благодатную для роста организмов среду. Через некоторое время можно делать вывод о наличии тех или иных организмов, которые провоцируют заболевание.

Следующий этап — врач подбирает самый эффективный антибиотик, отслеживая реакцию бактерий на различные его виды. Другими словами, специалист рассматривает чувствительность микроорганизмов на каждый из них. Во время такого анализа происходит не только качественная оценка (вид микроорганизма), но и количественная (его концентрация).

Эта методика считается самой прогрессивной и надежной. Помните, что забор и изучения материала происходит до начала лечения, в крайнем случае — в период между курсами терапии.

Показания к проведению анализа на бак посев

Данное исследование назначают тем пациентам, которые состоят в группе риска заболеть венерологической болезнью.

Существуют еще вирусы, которые передаются в большинстве половым путем. Это:

герпес и ВПЧ (вирус папилломы человека);
молочница;
трихомониаз;
бактериальный вагиноз (нарушение флоры);
атрофический вагинит (у пожилых женщин);
возбудители гонореи (гонококки);
хламидиоз;

Кроме того, обязательным показателем для проведения исследования являются:

беременность (если вы ее не планировали и не сдавали при этом анализ на бак посев);
когда происходят воспалительные процессы в малом тазу;
когда у беременной женщины, во время исследования анализа мазка на флору обнаружили грамотрицательных диплококков;
вульвовангит у женщины в хронической или рецидивирующей форме.

На приеме врач, прежде всего, назначает мазок на бактериологический посев. Этот метод дает возможность определить заболевание и подобрать правильное лечение. Все разновидности заболеваний, связанных с бактериями, лечат антибиотиками. Антибиотики быстро справляются с бактериями и улучшают самочувствие. Но не стоит забывать, что любой антибиотик уничтожает не только вредоносные, но и полезные микроорганизмы. Организм остается совершенно беззащитным перед множеством инфекций. Вот почему так важно определить именно тот препарат, который надежнее и быстрее других справится с задачей.

Также при разнообразных герпесах, вирусах папилломы, молочнице, желательно сделать мазок для забора материала на проверку.

Подготовка к исследованию

Бактериологический посев на флору проводится для:

установления возбудителя заболевания;
подбора рационального решения возникшей проблемы;
оценки эффективности терапии, которая уже проводится.

Бак посев мазка на флору требует тщательной подготовки. От этого зависит исход анализа, а, следовательно, и подбор правильного лечения. Так что стоит отнестись серьезно к рекомендациям врача.

Рассмотрим этапы подготовки:

Забор материала для бактериологического посева

Рассмотрим примеры биологических материалов, которые могут брать на исследование:

кровь берут на анализ при постоянно повышенной температуре, она является неплохим индикатором на выявление различных кишечных заболеваний, которые спровоцировали бактерии;
мазки верхних дыхательных путей — для диагностики инфекционных заболеваний этой зоны (дифтерии, коклюша, скарлатины) которые вызвало повышенное количество микроорганизмов;
моча: забор происходит при воспалительных процессах в почках и мочевом пузыре, изучения материала дает самые точные результаты, что значительно влияет на качество лечения и результат;
отделяемое ран: при воспалительных процессах, которые происходят в ране и не дают коже нормально регенерироваться; это может быть вызвано также бактериями;
кал: превосходный индикатор наличия в желудочно-кишечном тракте болезнетворных бактерий, но есть один нюанс: в данной среде нашего организма бактерии пребывают в большом количестве постоянно, поэтому важно проводить исследования в динамике (периодично);
мазок — это женский анализ, который выявляет наличие в организме возбудителей венерических и гинекологических заболеваний.

Ход лабораторных исследований материала

Вы пришли сдавать бактериологический посев на флору. После того как у вас взяли необходимый образец, его помещают в благоприятную для роста среду. Если специалисты все-таки выявили наличие патогенных организмов, они начитают проводить тестирование антибиотиками, чтобы получить оптимальный результат. Таким образом, они определят препарат, который в вашем случае будет самым эффективным.

Бывает так, что в ходе лабораторных исследований обнаружили не один, а несколько видов бактерий, параллельно существующих в организме пациента. Тогда специалистам потребуется немного больше времени, чтобы синтезировать тот антибиотик, который будет эффективно решать сразу несколько задач.

Чтобы установить максимально верно, к каким видам антибиотиков микроорганизмы проявляют чувствительность, специалисты составляют антибиотикограмму. Для этой цели используют два метода:

Для первого способа берут специальные тестеры, что пропитывают концентратами препаратов-антибиотиков. Их помещают к бактериям и начинают наблюдать за их поведением. Так, по очереди подбирают ряд медикаментов, на которые патогенная бактерия реагирует особенно чувствительно.

Во втором случае, в среду к микроорганизмам помещают диски, которые пропитывают концентратами антибиотиков. При такой манипуляции происходит прекращение роста той бактерии, которая более всего чувствительна к определенному препарату.

О сервисе HTML карты сайта

Клиникам и врачам

Пациенту

Справочники

Цены, приведенные на сайте, неокончательные, не являются публичной офертой и носят ознакомительный характер.

Один из самых точных и информативных лабораторных исследований качества мочи (урины) — бактериологический анализ мочи (бакпосев, посев на микрофлору). Этот метод диагностики выявляет патогенные микроорганизмы и определяет их чувствительность к антибактикам. Это позволяет сэкономить время и сразу назначить эффективное лечение.

Прием уролога, гинеколога — 1000 руб. Комплексное УЗИ малого таза — 1000 руб. Прием по результатам УЗИ или анализов — 500 руб (по желанию)

Недостатком анализа можно назвать особые требования к сбору материала и длительность теста. Однако лишь при посеве мочи врач получает точную уникальную информацию, которую часто не способны показать другие лабораторные исследования.

Показания для назначения бакпосева мочи

Анализ мочи на посев может быть назначен терапевтом, гинекологом , урологом или педиатром в следующих случаях:

при инфекциях мочевыделительной системы (рецидивирующий цистит , пиелонефрит , урологические патологии, мочекаменная болезнь );
при болезнях органов ЖКТ (энтерококк и дизентерия);
при сахарном диабете , беременности и бесплодии , иммунодефиците, туберкулёзе, ВИЧ;
для контроля эффективности проведённого лечения инфекции ;
для уточнения диагноза при неоднозначной симптоматике;
для выявления устойчивости микроорганизмов к антибактериальной терапии.

Также бакпосев мочи может назначаться при наличии следующих симптомов:

нарушение частоты мочеиспусканий (может свидетельствовать о поражении почек, простатите );
тошнота, рвота, общая слабость, повышение температуры (симптомы заболевания почек);
боль в пояснице (сигнал возможного развития бактерий в почечных канальцах);
изменение цвета мочи.

Какие патологии выявляет бактериологический анализ мочи

Бакпосев на патогенную флору поможет диагностировать такие заболевания, как:

хронический уретрит ;
рецидивирующий цистит;
пиелонефрит;
паранефрит.

Бактериологический анализ мочи выявляет следующие инфекции в зависимости от возбудителя:

Стафилококки и стрептококки . Выявляет все виды патогенных микроорганизмов, опасных при беременности для ребёнка; . Патогенные микроорганизмы в урине подтверждают сомнительный диагноз; . Назначается пациенту, если его партнёр — носитель вируса;
Бациллу Коха . Степень бактериурии определяет наличие туберкулёза и насколько поражены почки и мочевыводящие пути при таком заболевании;
Протеи . Протейная инфекция вызывает воспаление почек и мочевыводящих путей, может привести к острому пиелонефриту;
Энтерококки . Эти кишечные бактерии могут быть губительными для мочевыводящей системы;
Синегнойную палочку. Эта бактерия является причиной циститов, уретритов и пиелонефритов;
Коклюш . Анализ выявит болезнь даже на ранней стадии и при начальных
симптомах;
Клебсиеллы . Опасная бактерия, устойчивая к большинству антибиотиков. Вызывает воспалительные заболевания мочевыводящих путей и может привести к различным тяжёлым последствиям;
Дизентерийные соединения . Способен выявить сальмонеллез и дизентерию у пациентов любого возраста.

Методика исследования мочи на инфекции

Для идентификации инфекционного возбудителя анализ урины на посев проводится по следующему алгоритму:

Первичное исследование осадка мочевой жидкости под микроскопом (проводится не всегда).
Первичный посев мочи на стерильность для выявления типа возбудителя.
Накопление собранной в посеве культуры.
Изучение особенностей выявленных бактерий.
Окончательная идентификация возбудителя.

Для теста — посев мочи — необходим подбор определённой среды: для стафилококков – кровяной агар, стрептококков – сахарный раствор и т.д. Однако могут проводить посев и в нескольких средах (максимум 3-4).

Бактериологический анализ мочи в целом занимает 7-10 дней. Полученный результат будет содержать описание величины, формы, прозрачности, оттенка, структуры поверхности, роста колонии в высоту.

Методика определения чувствительности возбудителей к антибиотикам

Для определения чувствительности микроорганизмов к антибиотикам (антибиотикограмма) анализ урины на посев проводится по следующему алгоритму:

Деление чаши Петри на несколько секторов и помещение в каждый из них полоски с антибиотиком.
Маркировка цветом каждого участка и засев выделенной культурой.
Помещение чаши в термостат с температурой 36,6.
Ведение ежедневного контроля. Отсутствие роста и размножения бактерий означает, что антибиотик их подавляет, а значит подобран верно.

В противном случае возбудитель устойчив к действию данного антибиотика, и его нужно заменить.

Антибиотикограмма проводится только при обнаружении бактерий более, чем 104 КОЕ/мл. Длительность такого анализа составляет 4-5 дней. Современные экспресс-методики позволяют получить результат уже через 2 дня. В экстренных случаях, когда результат необходим для лечения тяжелобольного пациента, предварительные данные могут быть предоставлены уже спустя 4 часа.

Подготовка к процедуре и сбор мочи на посев

Для получения реальной картины состояния внутренней микрофлоры крайне важно соблюсти все требования относительно подготовки и сбора мочи:

Анализ посев мочи при беременности

В период беременности женщина ещё больше, чем обычно, уязвима для различных болезней. К ним относятся и инфекции различного генеза, включая передающиеся половым путём. К тому же, исследованиями доказано, что 45% всех смертей плода ( замирание беременности , выкидыш ) случилось из-за внутриутробного инфицирования.

Бактериологический анализ мочи во время беременности обязателен, даже при отсутствии признаков инфекции. Инфекция длительно и бессимптомно могла протекать в организме женщины и активизироваться при наступлении беременности (до 6% беременных имеют скрытую бактериурию).

Важность проведения анализа мочи на посев во время беременности подтверждается следующим:

выявление и идентификация возбудителей инфекции;
проведение возможного лечения с учётом срока беременности;
предупреждение заражения плода и нанесения ему непоправимых органных изменений, несовместимых с жизнью.

Проводить бакпосев мочи нужно дважды за беременность – в 1 триместре и практически перед самыми родами (на 36 неделе). При наличии соответствующих показаний это значение может увеличиться. Врач может назначить беременной дополнительные бакпосевы мочи, если она страдает заболеваниями мочевого пузыря и почек, или при общем анализе мочи были обнаружены лейкоциты и белок.

Правила подготовки и сбора материала для беременной общие. На поздних сроках беременности плод давит на мочевой пузырь, поэтому женщине порой трудно дотерпеть до утра. Рекомендуется сходить в туалет по будильнику в 1-2 часа ночи, а затем уже утром собрать мочу для анализа.

Расшифровка результатов бакпосева мочи: норма и патология

Результат анализов выводится в КОЕ на 1 мл мочи. КОЕ (колониеобразующие единицы) – это абсолютное значение, показывающее количество клеток бактерий в 1 мл урины.

Лаборатория выдаст распечатку результатов, в которой будут указаны все виды микроорганизмов, их количество, измеренное в КОЕ/мл, и антибиотикограмма – группы препаратов, к которым чувствителен каждый вид бактерий.

Результат бакпосева не всегда однозначно положительный или отрицательный. Он имеет референсные значения, которые указывают на степень воспаления.

Менее 1000 КОЕ/мл	Норма, лечение не требуется.
1000-100000 КОЕ/мл	Требуется повторное исследование. Возможно, результат искажён из-за нарушения правил подготовки или сбора мочи.
Более 100000 КОЕ/мл	Наличие инфекции, необходимо срочно начинать лечение.

На бланке антибиотикограммы проставляются значки:

Обозначение	Уровень чувствительности к антибиотикотерапии
S	высокий
I	умеренный
R	полная резистентность (устойчивость) к антибиотикам

Где сдать анализ мочи на инфекции и сделать расшифровку бакпосева в СПБ?

Такое обследование в Санкт-Петербурге проводится в специализированной уролого — гинекологической клинике Диана. Здесь же можно пройти все виды экспертного УЗИ (стоимость 1000 руб), сдать все анализы и получить консультацию гинеколога, уролога, эндокринолога , онколога и дерматолога . Стоимость консультации любого специалиста — 1000 руб.

Читайте также: